不少老师对幽门螺杆菌的培养及药敏感兴趣，但苦于不知道应该需要哪些材料以及如何操作。希望这篇课件可以解决老师们的疑惑！文末有福利哦！
胃活检组织标本的采集：
胃体、胃窦各取一份至少2块，最好4块，若有溃疡，最好在溃疡附近采集。
标本的运送：
运送培养基，淹没组织块，10℃以下16小时内送检并接种孵育，如，添加冰块的小泡沫盒。资料显示，4℃存放1周，存活率达81%。
运送培养基若显示红色，则可作为初步筛选，也可以用此管做脲酶试验。有可能因运送温度偏低使得脲酶反应不明显。
有资料显示，使用经过厌氧或微需氧预培养的适于嗜血杆菌的培养基作为转运培养基对幽门螺杆菌的分离培养效果也很好。具体方法可以摸索。但是我们的无血幽门螺杆菌分离培养基效果更好。
标本的处理和初步检测：
压碎的组织放一部分在快速尿素检测管中可在1~3小时获得结果，如果阴性，可放置过夜再确认结果。
镜检，压碎的标本可用H.p专用革兰染色液染色或吖啶橙染色（更敏感些）。H.heilmannii也是尿素阳性，但很难培养，可通过镜下特征与幽门螺杆菌区分，H.heilmannii也是螺旋状，但菌体比幽门螺杆菌的大得多，螺旋更密集。
培养基：
1）接种H.p分离培养琼脂培养基，含抑制剂。接种的组织标本要研磨碎。
2）接种培养基推荐：幽门螺杆菌无血选择性琼脂（生长效果更好），布鲁氏血琼脂（无抑制剂）。
孵育条件：
微需氧，有氢气更能促进其生长；37℃，初代分离5~7天。初代分离的时间较长。庞通公司生产的气体环境商品：微需氧产气袋，塑料培养可密封袋，密封夹，气体罐+培养箱或培养罐。
幽门螺杆菌的鉴定：
镜下形态：革兰阴性（改良的专用革兰染色液。若用普通革兰染色液，着色淡），螺旋状，弯曲或S形，较小；H.heilmannii（很难培养）感染的胃组织标本也是尿素阳性，但是可以通过镜下形态区分——菌体大，典型的螺旋状，螺旋密集。
氧化酶阳性（几分钟），触酶阳性（几秒钟），尿素酶阳性（1~3h），马尿酸盐水解试验阴性（1~2小时），醋酸吲哚试验阴性（10~20分钟）。
药敏试验：
标准：纸片法可采用丹麦Neo-sensistabal的判读标准
接种物：3-4号麦氏标准浊度
按CLSI纸片扩散法执行标准操作涂抹接种M-H血琼脂
药敏试验培养基：MH马血琼脂
孵育条件：37℃，微需氧，72小时
以上所用试剂、培养基和微需氧产气袋等（药敏纸片除外），均由重庆庞通公司注册、生产、提供。
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