幽门螺杆菌(Helicobacterpylori)是一种革兰氏阴性致病菌，成功定植于世界一半人口的胃粘膜，持续性幽门螺杆菌感染可诱发慢性胃炎，是胃恶性肿瘤最常见的风险因素之一，但其机制尚未研究清楚。1月4日，来自日本大阪大学微生物疾病研究所的ShoYamasaki团队，在期刊《TheJournalofExperimentalMedicine》上发表了题为“HelicobacterpylorimetabolitesexacerbategastritisthroughC-typelectinreceptors”的文章，揭示了幽门螺杆菌的2种代谢产物αCAG和αCPG可以分别激活C型凝集素受体Mincle和DCAR，加剧幽门螺杆菌诱导的小鼠胃炎。IF：11.。

幽门螺杆菌(H.pylori)诱导特异性T细胞的应答促进胃炎进展，而幽门螺杆菌通过修改TLRs的配体来逃避TLR(识别抗原并激活机体产生免疫细胞应答)的检测，但其激活T细胞的潜在机制尚不清楚。幽门螺杆菌会产生不同的脂质，尤其是各种胆固醇代谢物，如胆甾醇酰基α-葡萄糖苷(αCAG)，能抑制宿主免疫。C型凝集素受体(CLR)可识别各种病原体衍生的糖复合物，但不清楚CLR家族成员是否识别幽门螺杆菌中的固醇糖苷，以及CLR是否参与胃炎诱导。

幽门螺杆菌具有Mincle识别的免疫刺激脂质成分

提取幽门螺杆菌脂质成分，并评估其诱导BMDC(骨髓来源的树突状细胞)产生炎性细胞因子的能力，发现组分13-14活性最高，并且在敲除CARD9或FcRγ后完全消失，表明FcRγ-CARD9偶联的免疫受体(包括CLR)参与配体识别和信号传导。在NFAT-GFP报告细胞中表达与FcRγ结合的CLRs，发现Mincle和MCL组中组分13-14活化，因此，创建Mincle-CD3ζ和MCL-CD3ζ嵌合体，证实了Mincle能识别组分13-14，在Mincle缺陷的BMDC中，组分13-14诱导的TNF生成被取消。

αCAG鉴定为非典型Mincle配体

经过验证，组分13-14的活性呈Mincle剂量依赖性，测定组分13-14的化学成分，发现其主要化学成分为αCAG。由于糖基转移酶Hp是合成αCAG第一步的关键酶，构建幽门螺杆菌Hp敲除菌株H.pyloriΔhp，脂质成分提取物中缺乏对应于αCAG的HPTLC条带，并且等效部分未能激活Mincle报告细胞和BMDCs。因此，αCAG是一种显性幽门螺杆菌脂质，通过Mincle发出信号。

αCAG的免疫刺激特性

化学合成αCAG，发现其强效激活报告细胞表达Mincle，水平与TDM(海藻糖6，6’二分支酸酯)相当，αCAG与Mincle直接结合。在树突状细胞(DC)中，合成的αCAG通过Mincle诱导炎性细胞因子的分泌、共刺激分子的上调和2型一氧化氮合酶(NOS2)，此外，αCAG可有效激活人单核细胞来源的DC(hMoDC)产生促炎性细胞因子IL-8。用OVA-specificTCR转基因小鼠的T细胞与OVA-pulsedBMDCs在有或无合成αCAG的情况下共同培养，存在αCAG时，IFN-γ和IL-17的抗原特异性生成增加，经过进一步确定，发现αCAG-Mincle-FcRγ轴通过APC活化促进抗原特异性T细胞启动。

Mincle对幽门螺杆菌诱导胃炎的病理生理学作用

用幽门螺杆菌SS1菌株感染WT和Clec4e-/-小鼠，Clec4e-/-小鼠T细胞产生的IFN-γ和IL-17少，但Clec4e-/-和WT小鼠胃中的细菌数量相当，表明幽门螺杆菌特异性Th1/17细胞应答不能有效促进细菌根除。此外，Clec4e-/-小鼠胃炎程度较轻，中性粒细胞和巨噬细胞数量被抑制，炎症基因表达降低。表明抗体(Ab)阻断Mincle导致T细胞反应的抑制和慢性胃炎，而不增加幽门螺杆菌的数量。

非靶向脂质组学揭示幽门螺杆菌代谢物炎症转化

在厌氧条件下，幽门螺杆菌由螺旋形转化为球状形式，具有更强的免疫刺激活性，非靶向脂质组学显示，螺旋/球状转化显著改变了脂质组成，特别是对于含胆固醇的脂质，αCAG的活性随着脂肪酸脂肪酰基链的延长而增加。在球状形式下，极性糖脂(SpotC)的量显著增加，且使IL-6呈剂量依赖性增加。鉴定SpotC为胆甾醇磷脂酰α-葡萄糖苷(αCPG)，针对αCPG的脂质组学数据显示，在TLC上观察到球状形式的αCPG的相对量显著增加，而与αCAG相反，其脂肪酸组成保持不变，经过合成αCPG验证，αCPG通过DCAR发出信号。

幽门螺杆菌中αCAG/αCPG的耗竭损害其毒力

在H.pyloriΔhp的螺旋和球状形式中，αCAG和αCPG完全丢失，BMDC表面CD80上调受损，H.pyloriΔhp与模型抗原致敏DCs和OT-IIT细胞共培养，OT-IIT细胞的抗原依赖性分泌物IFN-γ和IL-17T显著下降，加入合成αCAG后，细胞因子生成恢复，表明αCAG是负责T细胞启动的主要组分之一。此外，感染H.pyloriΔhp的小鼠胃炎显著改善，胃中的细菌数量没有显著变化，在WT小鼠感染H.pyloriΔhp以及Clec4e-/-小鼠感H.pyloriWT后检测到显著滴度的抗幽门螺杆菌Ab。表明，幽门螺杆菌通过αCAG和αCPG产生毒力促进胃炎而不影响体液免疫应答。

宿主胆固醇修饰的幽门螺杆菌代谢产物通过与C型凝集素受体的相互作用加剧胃炎。胆甾醇酰基α-葡萄糖苷(αCAG)和胆甾醇磷脂酰α-葡萄糖苷(αCPG)被确定为Mincle(Clec4e)和DCAR(Clec4b1)的非经典配体。慢性感染时，在Mincle缺陷小鼠中，幽门螺杆菌特异性T细胞应答和胃炎得到改善，细菌数保持不变。此外，缺乏αCAG和αCPG的突变幽门螺杆菌菌株表现出引起胃炎的能力受损。因此，幽门螺杆菌特异性修饰宿主的胆固醇发挥病理生理作用，通过触发C型凝集素受体加重胃部炎症。

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