来源：智慧病理网

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胃幽门螺杆菌（简称HP）是从人胃黏膜分离培养出的一种细菌，研究表明其与胃十二指肠溃疡、慢性胃炎、胃癌、黏膜相关性淋巴瘤等发生密切相关。目前病理中HP诊断的方法很多，如HE染色法，碱性品红染色法、等，但它们都有一定的局限性。现在我们介绍一种新的HP病理诊断方法，即BASO幽门螺杆菌染色法，它与上述染色方法相比，具有快速、简便、定位准确、易于观察，单张切片就能很好显示HP形态特征，并可重复染色等优点。

1.材料和方法

1.1材料①取成人胃黏膜活检组织，4％中性缓冲甲醛液固定，常规石蜡切片厚4～6靘。②BASO幽门弯曲杆菌染色液，即BASO即用型试剂，有3种包装规格：20ml、ml和ml，珠海贝索生物技术有限公司。注：粤食药监械生产许号。粤珠食药监械（准）字第号。YZB/粤珠-。

1.2方法①W-S银染色法：此法是显示螺旋菌的经典方法。近年来将此法稍加改进应用于显示幽门螺杆菌。该方法染色时需要加热，显影后还需要在热水中浸洗，并严格掌握显影时间。②碱性品红法：该法是目前弯曲杆菌的常用于筛查染色方法。此法为一步染色操作，碱性品红染色30min，用蒸馏水冲洗干净晾干即可。③HE染色：此法是病理诊断常规染色，但显示幽门螺杆菌不够理想。④BASO快速染色法染色步骤：(1)常规石蜡切片4～6靘，80℃烤片30min，常规脱蜡至水。(2)沥干切片上的水分。(3)直接将试剂滴加于组织切片上，并覆盖组织。(4)常温下胃幽门螺杆杆菌染色液染色5～10min。(5)流水冲洗至染液不再脱落。(6)干燥切片，中性树胶封固。(7)显微镜观察。

2.结果

W-S银染色法细菌呈棕黑色或黑色，背景呈淡黄色（图1）；碱性品红染色法细菌和背景均呈紫红色（图2）；HE染色法（图3）；BASO染色法胃幽门螺杆杆菌呈蓝色，红细胞绿色，背景蓝色（图4）。

图1示：W-S银染色×，见胞核呈蓝色，胞核与HP呈黑色，胞质黄色。

图2示：碱性品红染色×，见组织和HP均呈紫红色，细菌形态模糊不易辨认。

图3示：HE染色×，见HP形状同上，胞质和HP均呈红色，细菌形态不清楚。

图4示：BASO染色×，HP呈蓝色，红细胞绿色，背景蓝色。

3．讨论

胃幽门螺杆菌是存在于胃幽门等部位的一种细菌，主要生存于胃黏膜上皮和胃腺体黏膜屏障之间，其形态特点是短杆状，两端微弯曲的革兰阴性杆菌，所以称为胃幽门弯曲菌（Campylobracterpyloridis）。研究已经证实胃幽门螺杆菌可能与慢性胃炎、消化性溃疡和胃肿瘤等多种胃部疾病有密切关系。其分布以胃窦最高，胃体、胃底次之，有时在十二指肠也可检出。胃幽门螺杆菌适合于中性环境，故常见于胃表面上皮黏液内和胃小凹内。HP与胃病的关系密切，其染色结果对治疗方法、药物的选择有着重要关系。

胃幽门螺杆菌含有蛋白和多糖物质，在一定温度硝酸银溶液作用下能够吸附银离子，再经过还原的显色剂使弯曲菌被还原为金属，也成为嗜银性胃幽门螺杆菌。显示胃幽门螺杆菌一般采用传统的硝酸银法，但该法的试剂组成与操作步骤都比较复杂，而Baso胃幽门螺杆菌染色液是采用单试剂染色法，主要成分是天青Ⅱ,能够清晰显示胃幽门螺杆菌。现将一些常用胃幽门螺杆菌染色方法与BASO快速法比较如下见表1：

表1常用胃幽门螺杆菌染色方法与BASO快速法比较

由此可见，上述传统胃幽门螺杆菌染色方法都有一定的局限性，而我们应用的BASO快速法显示胃幽门螺杆菌有以下优点：（1）操作简便，只需将染液直接滴入脱蜡后的切片组织上；（2）方便快捷，整个操作过程只需5～10min；（3）单张切片就可很好显示HP形态特征、并可重复染色；（4）结果稳定，可长期保存；（5）定位准确，易于观察，在40×物镜下就可直接观察到HP形态。

在日常使用过程中，我们建议应注意以下几点：（1）原包装未开封试剂有效期为18个月，在有效期内的已开封试剂应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。（2）试剂盒应储存于相对湿度不大于80%，无腐蚀性气体和通风良好的5℃～30℃室温环境。（3）组织片应充分固定和脱蜡完全。（4）医院或环保部门要求处置废弃物。

参考文献

［1］楼方岑主编.医疗护理技术操作常规［M］.北京:人民卫生出版社..

［2］张哲,陈辉主编.实用病理组织染色技术［M］.沈阳:辽宁科学技术出版社,.-.

［3］凌启波编著.实用病理特殊染色和组化技术［M］.广州:广东高等教育出版社,.42-45.

［4］龚志锦,詹镕洲编著.病理组织制片和染色技术［M］.上海:上海科学技术出版社,.-.

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