幽门螺杆菌的花样检测方式
幽门螺杆菌的“花样”检测方式
幽门螺杆菌有哪些检测方式?各种检测方式有何利弊?检测中应当注意哪些问题?来源:医院消化内科
Hp感染的检测方法
包括侵入性和非侵入性两类。
侵入性方法依赖胃镜活检,包括快速尿素酶实验(RUT)、胃黏膜直接涂片染色镜检、胃黏膜组织切片染色(如HE、Warthin-Starry银染、改进Giemsa染色、甲苯胺蓝染色、吖啶橙染色、免疫组化染色等)镜检、细菌培养、基因方法检测(如PCR、寡核苷酸探针杂交、基因芯片检测等)。非侵入性检测方法不依赖胃镜检查,包括13C或14C尿素呼气实验(UBT)、粪便Hp抗原检测(HpSA)(依检测抗体分为单克隆和多克隆抗体检测两类)和血清Hp抗体检测等。
各种检测方法的特点
T:检测结果受试剂pH值、取材部位、组织大小、细菌最、视察时间、环境温度等因素影响。同时取2块组织进行检测(胃窦和胃体各1块),可以提高检测敏感性。本方法检测快速、方便;运用良好试剂检测,准确性高。患者接受胃镜检查时,建议常规行RUT。
2.组织学检测:检测Hp的同时,可对胃黏膜病变进行诊断(HE染色)。不同染色方法的检测结果存在一定差异。免疫组化染色特异性高,但费用亦较高;HE染色可同时作病理诊断;荧光原位杂交(FISH)检测Hp感染具有较高敏感性,也被用于Hp对克拉霉素耐药的检测。
3.细菌培养:复杂、耗时,需一定实验室条件,标本转送培养需专门的转送液并保持低温。培养检测特异性高,可进行药敏实验和细菌学研究。
T:检测准确性高,易于操作;可反应全胃Hp感染状态,克服因细菌呈“灶性”散布而造成的RUT假阴性。但UBT检测值处于临界值附近时,结果不可靠,可间隔一段时间后再次检测或用其他方法检测。
5.粪便抗原检测:经过验证的单克隆抗体法检测具有较好的敏感性和特异性;可用于Hp医治前诊断和医治后复查;操作安全、简便;不需要口服任何试剂,适用于所有年龄和类型的患者。国际共鸣认为该方法的准确性可与呼气实验媲美,但国内目前尚缺少相应的试剂。
6.血清抗体检测:检测的抗体是IgG,反应一段时间内Hp感染情况,部份试剂盒可同时检测CagA和VacA抗体。不同试剂盒检测的准确性差异较大;与其他细菌抗原有一定交叉反应。Hp根除后血清抗体,尤其是CagA抗体可以保持很久(数月至数年),因此不能用于医治后复查。本方法主要适用于流行病学调查,在消化性溃疡出血或胃MALT淋巴瘤等可作为现症感染的诊断手段。
7.分子生物学检测:可用于检测粪便或胃黏膜组织等标本。适用于标本中Hp含量过少或因含大量其他细菌干扰Hp检测的情况,还可用于Hp分型和耐药基因突变的检测。目前国际上已有用于检测Hp对克拉霉索和喹诺酮类耐药基因突变的商品化试剂盒,国内研究和开发了可检测耐药基因突变的基因芯片,已开始在临床试用。
Hp耐药性检测的主要方法
1.通过细菌培养进行检测:包括耐药纸片法、琼脂稀释法和E-test法等。
2.分子生物学检测:对耐药基因突变进行分析,包括商品化的试剂盒和基因芯片检测等。
Hp感染的检测
感染的诊断:符合下述3项之一者可判断为Hp现症感染:(1)胃黏膜组织RUT、组织切片染色或培养三项中任一项阳性;(2)13C或14CUBT阳性;(3)HpSA检测(经过临床验证的单克隆抗体法)阳性。血清Hp抗体检测(经临床验证、准确性高的试剂)阳性提示曾感染,从未医治者可视为现症感染。
感染根除医治后的判断:应在根除医治结束最少4周后进行,首选UBT。符合下述3项之一者可判断为Hp根除:(1)13C或14CUBT阴性;(2)HpSA检测阴性;(3)基于胃窦、胃体两个部位取材的RUT均阴性。
实行中需注意的问题
1.不同检测试剂的准确性存在差异,运用的试剂和方法需经过验证。
2.检测结果的准确性遭到操作人员和操作方法差异的影响。
3.避免某些药物对检测的影响。运用抗菌药物、铋剂和某些有抗菌作用中药者,应在最少停药4周后进行检测;运用抑酸剂者应在最少停药2周后进行检测。
4.不同疾病状态对检测结果会产生影响,消化性溃疡活动性出血、严重萎缩性胃炎、胃恶性肿瘤可能会致使尿素酶依赖的实验呈假阴性。不同时间、采取多种方法或采取非尿素酶依赖实验的方法检测可获得更可靠结果。
5.残胃者用UBT检测Hp结果不可靠,推荐用RUT、组织切片方法或HpSA方法。
6.胃黏膜肠化生组织中Hp检出率低。存在活动性炎症时高度提示有Hp感染;活动性消化性溃疡患者排除NSAIDs及阿司匹林因素后,Hp感染的可能性95%。因此,在上述情况下,如Hp检测阴性,要高度怀疑假阴性。不同时间或采取多种方法检测可获得更可靠结果。
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